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技術(shù)文章

Technical articles

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  • 20136-17
    流式細(xì)胞儀標(biāo)本的制備

    流式細(xì)胞儀標(biāo)本的制備流式細(xì)胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學(xué)、激光、計算機(jī)等高技術(shù)發(fā)展起來的一種先進(jìn)儀器,已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、生物化學(xué)、生物學(xué)、腫瘤學(xué)以及血液學(xué)等方面的研究和臨床常規(guī)工作。其中檢測人白細(xì)胞表面標(biāo)志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細(xì)胞群和亞群進(jìn)行分類,還能分離純化某一群或亞群細(xì)胞?;罴?xì)胞免疫熒光技術(shù)是用于FCM檢測的標(biāo)本準(zhǔn)備,染色后也能在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察,在某些實驗條件下,活細(xì)胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優(yōu)于滴片固定的常規(guī)間接免...

  • 20136-17
    ELISA原理,以及操作步聚

    ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。(一)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除...

  • 20136-17
    標(biāo)本的收集與保存注意事項

    臨床檢驗常見的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。一、血液標(biāo)本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷...

  • 20136-13
    Western Blot 原理和操作方法

    WesternBlot工作原理蛋白質(zhì)的電泳分離是重要的生物化學(xué)分離純化技術(shù)之一,電泳是指帶電粒子在電場作用下,向著與其電荷相反的電極移動的現(xiàn)象.根據(jù)所采用的支持物不同,有瓊脂糖凝膠電泳,淀粉凝膠電泳,聚丙烯酰胺凝膠電泳等.其中,聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)由于無電滲作用,樣品用量少(1-100μg),分辨率高,可檢出10-9-10-12mol的樣品,凝膠機(jī)械強(qiáng)度大,重復(fù)性好以及可以通過調(diào)節(jié)單體濃度或單體與交聯(lián)劑的比例而得到孔徑不同的凝膠等優(yōu)點而受到廣泛的應(yīng)用.SDS-PAG...

  • 20136-13
    熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細(xì)胞中比率鈣

    熒光探針Fluo-3/AM和FuraRed測量單細(xì)胞中比率鈣中國醫(yī)學(xué)物理學(xué)雜志1999年第3期第16卷實驗研究作者:馬曉冬朱曉亮趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀單位:馬曉冬趙清張瑾張颯雷國華黃行許鮑永耀(*軍醫(yī)大學(xué)中心實驗室);朱曉亮(南方醫(yī)院皮膚科,廣東廣州510515)關(guān)鍵詞:激光掃描共聚焦顯微鏡;Fluo-3/AM;FuraRed;比率鈣...摘要:應(yīng)用ACAS570激光掃描共聚焦顯微鏡(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM簡稱共焦顯微...

  • 20136-13
    激光掃描共焦顯微鏡原理及其應(yīng),細(xì)胞上的定位很漂亮

    激光掃描共焦顯微鏡(LSCM)是八十年代問世的一種新型分析儀器,由于其高分辨率,高靈敏度,高放大率等特點,在細(xì)胞水平上能作多種功能測量和分析,成為分析細(xì)胞學(xué)的重要研究工具,激光掃描共焦顯微鏡是在顯微鏡基礎(chǔ)上配置激光光源,掃描裝置,共軛聚焦裝置和檢測系統(tǒng)而形成的新型顯微鏡。它對活細(xì)胞分層掃描后得到光學(xué)切片,可進(jìn)行細(xì)胞三維重建。測量分析細(xì)胞形態(tài)學(xué)參數(shù)和熒光強(qiáng)度。利用熒光探針標(biāo)記LSCM可以對細(xì)胞內(nèi)微細(xì)結(jié)構(gòu)和離子的動態(tài)變化進(jìn)行定性、定量、定時和定位分析。LSCM可以進(jìn)行顯微手術(shù),細(xì)...

  • 20136-13
    流式細(xì)胞儀測定血小板胞漿游離鈣濃度

    流式細(xì)胞儀測定血小板胞漿游離鈣濃度莊明明,溫奕欣,劉少列,洪曉鵬西安交通大學(xué)學(xué)報2005年10月第26卷第5期摘要:目的建立流式細(xì)胞儀測定血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的方法。方法用Fluo3AM作為鈣指示劑,在有或無細(xì)胞外鈣\[Ca2+\]o存在的條件下,測定靜息和凝血酶激活狀態(tài)下人血小板胞漿游離鈣離子濃度\[Ca2+\]i的變化。結(jié)果Fluo3AM標(biāo)記的血小板的平均熒光強(qiáng)度明顯增加。凝血酶使負(fù)載Fluo3AM標(biāo)記的血小板胞漿\[Ca2+\]i明顯增加,且...

  • 20136-13
    如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?

    培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)"細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)"細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)AIMV(12005)培養(yǎng)基(SFM)。L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一...

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